盡管光度計種類型號繁多,但它們都是由相同的基本部件組成的,包括光源、單色器、吸收池和檢測系統(tǒng)。
主要部件
光源
在測量吸光度時,要求光源發(fā)出所需波長范圍內的連續(xù)光譜,要具有足夠的光強度,并在一定時間內能保持穩(wěn)定。
在可見光區(qū)測量時,通常使用鎢絲燈作為光源。鎢絲加熱到白熾狀態(tài)時會發(fā)出波長在320~2500nm之間的連續(xù)光譜。鎢絲燈工作溫度一般為2600~2870K,熔點為3680K。鎢絲燈的溫度決定于電源電壓,電源電壓的微小波動會引起鎢燈光強度的很大變化,因此必須使用穩(wěn)壓電源。在紫外區(qū)測量時,常采用氫燈或氘燈產生波長在180~375nm之間的連續(xù)光譜作為光源。其理想光源應具有覆蓋整個紫外可見光區(qū)的連續(xù)輻射,強度應比較高,且隨波長變化能量變化不大,但在實際上難以實現(xiàn)。氘燈輻射強度比氫燈高2~3倍,壽命也比較長。氙燈的強度一般高于氫燈,但欠穩(wěn)定,波長范圍180~1000nm,常用作熒光分光光度計的激發(fā)光源。
單色器
單色器是將光源發(fā)射的復合光分解為單色光的裝置。
一般由5部分組成:入光狹縫、準光氣(一般由透鏡或凹面反光鏡使入射光成為平行光束)、色散器、投影器(一般由一個透鏡或凹面鏡將分光后的單色光投影至出光狹縫)、出光狹縫。
色散器是單色器的核心部分,常用的色散元件是棱鏡或光柵。棱鏡由玻璃或石英制成,玻璃棱鏡色散能力強,但吸收紫外光,只能用于350-820nm波長的分析測定,在紫外區(qū)必須用石英棱鏡。
光柵的特點是:色散均勻,呈線性,光度測量便于自動化,工作波段廣。
吸收池
也稱為比色皿,是盛放樣品溶液的容器,具有兩個互相平行、透光且具有精確厚度的平面。玻璃吸收池光程長度一般為1cm,也有0.1-10cm的。
由于吸收池厚度存在一定誤差,其材質對光不是完全透明,在做定量分析時,對吸收池應做配套性試驗,試驗后標記出放置方向。
檢測系統(tǒng)
檢測系統(tǒng)包括檢測器和記錄顯示裝置。檢測器是一種光電轉換設備,將光強度轉變?yōu)殡娦盘栵@示出來。常用的檢測器有光電池、光電倍增管和光二極管陣列檢測器等。光電池的光電流較大,不用放大,用于初級的分光光度計上,疲勞效應嚴重。光電倍增管利用二次電子發(fā)射來放大光電流,放大倍數可高達108倍,應用最為廣泛。光二極管陣列檢測器由于全部波長同時被檢測,掃描速度快,可在0.1s內完成對190-800nm波長范圍的掃描。記錄顯示裝置包括放大器和結果顯示裝置。70年代采用數字讀出裝置。現(xiàn)代在主機中裝備有微處理機或外接微型計算機,控制儀器操作和處理測量數據,裝有屏幕顯示、打印機和繪圖儀等。