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酶標(biāo)儀濾光片識別系統(tǒng)雜光率&波長準(zhǔn)確性

文章來源: 人氣:8925 發(fā)表時間:2017-12-28

光柵型濾光片系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標(biāo)儀的主流,多家廠家共同努力,已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中,最關(guān)鍵的無疑就是光柵的雜光率和波長選擇的準(zhǔn)確性了。

透鏡,濾光片研發(fā)生產(chǎn).jpg


  

  雜光率指得就是光源通過光柵后,得到的光線中,“不需要”的波長的光占所標(biāo)稱波長的光的比例,表征了濾光的純度。由于光線干涉、衍射等的復(fù)雜性,無論使用濾光片還是光柵,雜光都是不可避免的。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。一般來說,濾光片型的雜光率在10-4~10-5之間,光柵型的可以做到10-6~10-7。由于此類雜光是非特異的,而且會直接進(jìn)入最后的檢測器,所以有多少的雜光就會引入多少的隨機(jī)誤差。在熒光等檢測過程中,由于檢測器存在放大效應(yīng),雜光率的干擾也會被指數(shù)級放大。因此,雜光率就是一個濾光片識別系統(tǒng)的首要性能指標(biāo)。

  光柵酶標(biāo)儀的另一個重要指標(biāo)就是波長選擇的準(zhǔn)確性。因?yàn)楹芏鄼z測是依賴于物質(zhì)在某個波長的特征圖譜。就像DNA/RNA的OD260濃度測定,實(shí)際檢測波長偏離260nm幾個nm以上的話,OD值與最終濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系就會發(fā)生改變。因此,一組性能優(yōu)良的光柵系統(tǒng),他的波長選擇準(zhǔn)確性應(yīng)該是在±0.5~1nm之間。波長偏離過大有時就會影響到最終結(jié)果的準(zhǔn)確性。

  這兩個可謂是光柵甚至濾光片濾光識別系統(tǒng)最關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù),直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測量的結(jié)果,是實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性的最基本要求。


 酶標(biāo)儀比色杯+微量檢測

  除了常規(guī)的6~384/1536孔酶標(biāo)板檢測之外,有些儀器還附帶了比色杯、微量檢測板等的兼容功能。無論是使用立式比色杯、臥式比色杯還是各種微量檢測板,其目的都是給光程不固定的酶標(biāo)板檢測引入一個標(biāo)準(zhǔn)光程的概念。雖然酶標(biāo)板檢測也能通過光程校正等方式實(shí)現(xiàn)10mm光程OD值的換算,但這只是一個數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換過程,檢測誤差累積較多,實(shí)際使用效果不佳。引入比色杯和微量檢測板后,光吸收的檢測光程就被固定在10mm或者0.5mm等的標(biāo)準(zhǔn)長度,OD值換算更加簡單和準(zhǔn)確。附帶了此類檢測功能的酶標(biāo)儀,相當(dāng)于除了本身的多功能酶標(biāo)檢測之外,還能替代部分分光光度計的功能,使其功能更加全面,儀器的性價比更高。


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