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　　酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺(tái)變相光電比色計(jì)或分光光度計(jì)，其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同. 圖示是一種單通道自動(dòng)進(jìn)樣的酶標(biāo)儀工作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過濾光片或單色器變成一束單色光，進(jìn)入塑料微孔極中的待測標(biāo)本.該單色光一部分被標(biāo)本吸收，另一部分則透過標(biāo)本照射到光電檢測器上，光電檢測器將這一待測標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號.電信號經(jīng)前置放大，對數(shù)放大，模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算，最后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果. 微處理機(jī)還通過控制電路控制機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運(yùn)動(dòng)來移動(dòng)微孔板，從而實(shí)現(xiàn)自動(dòng)進(jìn)樣檢測過程。

　　檢測單位：

　　光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。

　　檢測單位用OD值表示， OD是optical delnsity(光密度)的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度， OD=1og(1/trans)，其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系：

　　E=OD=logι0/ι其中E表示被吸收的光密度，ι0 為在檢測物之前的光強(qiáng)度，ι為從被檢測物出來的光強(qiáng)度。

　　OD值由下述公式計(jì)算：

　　E=OD=C×D×E

　　C為檢測物的濃度

　　D為檢測物的厚度

　　E為摩爾因子

　　在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會(huì)造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此，在測定檢測物時(shí)，我們選擇特定的波長進(jìn)行檢測，稱為測量波長。

　　但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個(gè)參照波長，以消除這個(gè)不準(zhǔn)確性。在參照波長下，檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。

　　Anthos 酶標(biāo)儀檢測值計(jì)算

　　儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量，轉(zhuǎn)換成二進(jìn)位數(shù)字信號，最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為 0%，沒有檢測物的透光值為100%。則實(shí)際檢測中，檢測物的透光值均在 0%一100%之間。透光值的計(jì)算如下：

　　T=(Meas—Min)/(Max—Min)

　　其中T為透光值， Meas為檢測的二進(jìn)位數(shù)值，Min為在 0%的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值， Max為在100%的情況下檢測的二進(jìn)位數(shù)值，舉例如下：

　　MaX=3600 Mn=20Meas=30

　　T=(30-20)/3600-20)=0.0028

　　OD=1og(1/T)=1og(1/0.0028)=2.552

　　Anthos 酶標(biāo)儀的中心定位

　　儀器會(huì)自動(dòng)對酶標(biāo)孔進(jìn)行中心定位，中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準(zhǔn)確。在對每一個(gè)酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測時(shí)，儀器其實(shí)要進(jìn)行35個(gè)點(diǎn)的測量，選取最中間的5個(gè)點(diǎn)的均值為本孔的OD值。

　　光源的參照通道

　　參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。

　　酶標(biāo)儀的用途和其它提示

　　用于ELISA試劑的測定，廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室，包括臨床實(shí)驗(yàn)室。

　　質(zhì)量控制

　　質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進(jìn)行質(zhì)量控制。

　　空白校正

　　有一些試劑盒的說陰書將空白孔設(shè)置為空氣，其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的，請按照試劑盒的說明書要求進(jìn)行。

　　檢測結(jié)果的解釋

　　由于有相當(dāng)多的因素會(huì)影響檢測的結(jié)果，如不同的酶標(biāo)板，檢測試劑的體積，都會(huì)造成OD值的不同，因此，只有使用同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測結(jié)果才能比較和分析。對結(jié)果的臨床解釋請依照試劑盒的說明書進(jìn)行。