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酶標儀的認證及參數(shù)參考標準

文章來源: 人氣:585 發(fā)表時間:2017-12-28

酶標儀在保證檢測可靠的基礎上,不同酶標儀器的下一個差異就體現(xiàn)在檢測的靈敏度上面,這時人們關(guān)心的就是儀器能夠檢測到多弱的信號。

透鏡,濾光片研發(fā)生產(chǎn).jpg


  

  酶標儀靈敏度涉及了整個光路系統(tǒng)的設計和選料,很難說某一個部件會起決定性作用。但是有一點,在各種單功能檢測項目中,光吸收檢測用非放大型的光電二極管、熒光檢測用光電倍增管、發(fā)光檢測用專門設計的單光子計數(shù)光電倍增管,這三種不同的檢測器是各自檢測領域的優(yōu)先選擇。

  酶標儀各單項檢測的最優(yōu)結(jié)果都是用相應檢測器完成的。當然也有的儀器出于成本等考慮,用一個檢測器兼容多種檢測模式,這在一定程度上也能完成實驗需求,但是在性能上也會有所犧牲折中,無法實現(xiàn)各項檢測都達到最優(yōu)化。

  關(guān)于靈敏度的定義和檢測標準,每個廠家都有各自的描述,都會說自己是怎樣怎樣好,很難有一個直觀的客觀比較。因此,某些試劑廠家就站了出來,對某些儀器的檢測性能提供一個第三方的認證。

  比較常見的是發(fā)光檢測領域里面的Promega公司DLReady認證,熒光檢測領域的Invitrogen公司的LanthaScreen系列認證、Cisbio公司的HTRF認證、BellBrook實驗室的Transcreener認證等等。這些認證主要是針對公司提供的某一類型的要求較高的試劑盒,涵蓋了對檢測儀器的各種性能要求,包括:檢測方法是否能用,靈敏度、線性范圍、孔間干擾等是否滿足要求等等。

  如果需要做相關(guān)的實驗,例如做Luciferase發(fā)光檢測的就看看儀器是否有DLReady認證、做TR-FRET的就看看HTRF認證、做FP就看看Transcreener認證,如果機器擁有相關(guān)的認證,就可以說明該機器在一定程度上能夠較好地滿足類似檢測的各種需求,遠比單單比較一個靈敏度參數(shù)更能說明問題。因為一個實驗能否做好并不是單單一個靈敏度就能表征的。

  需要特別注意的是,LanthaScreen是一個系列的認證,涵蓋了FI、FRET、TRF、FP等多個子項目,不同儀器所通過的子項目是不一樣的,需要上Invitrogen網(wǎng)站仔細查詢核對。

  光柵型的儀器由于新技術(shù)近幾年才逐漸興起,受限于技術(shù)研發(fā)和儀器成本,同一個價格范圍內(nèi)的靈敏度等指標會略差于發(fā)展成熟的濾光片機器。所以,在中檔多功能酶標儀領域,拿到了各種認證的光柵型儀器并不多見。而作為新一代光柵型酶標儀的代表作,TECAN M1000已經(jīng)拿到了全部上述四種認證,而且在靈敏度等單項性能上也已經(jīng)超越了不少的中高端濾片型酶標儀。

  這說明了光柵型酶標儀的研發(fā)又進入了一個新的高度,除了在靈活性上取得了無可替代的作用外,還在檢測靈敏度等方面也逐漸替代傳統(tǒng)的濾光片型酶標儀。光柵型是科研領域多功能酶標儀的未來主要發(fā)展趨勢;而濾光片型儀器也正在往單項性能更優(yōu)的方面改進。


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